以下是小鼠I型膠原蛋白(COL-1)ELISA試劑盒的核心技術(shù)說明及操作要點：

　　BS-9200 小鼠I型膠原蛋白(COL-1)ELISA試劑盒

　　一、檢測原理

　　采用雙抗體夾心法：

　　包被抗小鼠COL-1抗體捕獲樣本中的靶蛋白

　　標(biāo)記的二抗與靶蛋白結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)復(fù)合物

　　HRP催化TMB顯色，450nm波長測定OD值，濃度與吸光度呈正比

　　二、關(guān)鍵參數(shù)

　　項目? ?規(guī)格?

　　檢測范圍 0.33-50ng/mL(不同品牌有差異)

　　靈敏度 0.33ng/mL

　　樣本類型 血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)上清

　　板間變異系數(shù) <10%

　　回收率 84-108%(血清/血漿/細胞上清)

　　三、操作流程

　　樣本處理?

　　血清/血漿：2000-3000rpm離心20分鐘，避免反復(fù)凍融

　　組織樣本：需PBS勻漿后離心取上清

　　標(biāo)準品配制?

　　按說明書進行7梯度稀釋(通常1000ng/mL起始)

　　檢測步驟?

　　37℃孵育120分鐘→洗滌→加酶標(biāo)抗體→37℃60分鐘→TMB顯色15分鐘→終止反應(yīng)

　　四、注意事項

　　試劑使用前需平衡至室溫，不同批號禁止混用

　　白色微孔板需避光保存，透明板建議紫外線消毒

　　終止液含硫酸，接觸后立即用大量清水沖洗

　　注：部分品牌提供預(yù)包被板(如貨號BS-9200)，可節(jié)省包被時間。

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