中成藥及其提取物的安全性評價,是藥物后續(xù)開發(fā)過程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。基礎(chǔ)研究證實,中華跌打丸具有消腫止痛、舒筋活絡(luò)、止血生肌、活血祛瘀、挫傷筋骨、新舊瘀痛、創(chuàng)傷出血、風(fēng)濕瘀痛的炎癥反應(yīng)作用。目前,鬼畫符作為中華跌打丸 32 味藥材之一,其物質(zhì)基礎(chǔ)與藥效機制研究尚不明確,迫切需要采用現(xiàn)代研究手段進一步完善其功效評價,以便為鬼畫符的開發(fā)應(yīng)用和闡述中華跌打丸的藥理藥效提供科學(xué)依據(jù)。
日前,由環(huán)特生物與廣西中恒創(chuàng)新醫(yī)藥研究有限公司科研團隊聯(lián)合發(fā)表研究論文——《中華跌打丸及其藥材鬼畫符提取物的抗炎作用評價》,這是環(huán)特生物發(fā)布的第100篇期刊研究論文!

一、引言
中華跌打丸為廣西梧州制藥(集團)股份有限公司生產(chǎn)的產(chǎn)品,主要應(yīng)用于消腫止痛、舒筋活絡(luò)、止血生肌、活血祛瘀、挫傷筋骨、新舊瘀痛、創(chuàng)傷出血、風(fēng)濕瘀痛。鬼畫符作為中華跌打丸32味藥材之一,為大戟科(Euphorbiaceae)黑面神屬植物黑面神 Breynia fruticosa(L.) Hook. f. 的干燥全株,分布于浙江、福建、廣東、海南、廣西、貴州、云南等地。其味微苦,性涼,有小毒,歸脾、胃經(jīng),具有清濕熱、化瘀滯的功效。常用于治療腹痛吐瀉、疔毒、瘡癤、濕疹、皮炎、漆瘡、鶴膝風(fēng)、跌打腫痛。廣東和廣西地區(qū)用其治療支氣管炎,具有良好的療效。
目前,鬼畫符的物質(zhì)基礎(chǔ)與藥效機制研究尚不明確,迫切需要采用現(xiàn)代研究手段進一步完善其功效評價。斑馬魚是一種脊椎動物,與人類基因同源性高達 87%,可運用于動物實驗且實驗結(jié)果在人體適用性較高,是理想的模式生物。故本研究采用硫酸銅誘導(dǎo)建立轉(zhuǎn)基因中性粒細胞熒光斑馬魚炎癥模型對中華跌打丸與鬼畫符各提取物進行抗炎作用評價,旨在進一步明確鬼畫符和中華跌打丸抗炎作用的藥效物質(zhì)基礎(chǔ),為鬼畫符的開發(fā)應(yīng)用和闡述中華跌打丸的藥理藥效提供科學(xué)依據(jù)。
二、實驗結(jié)果
模型對照組斑馬魚炎癥部位中性粒細胞數(shù) 18 個,與正常對照組(4 個)比較 P<0.001,顯示硫酸銅誘發(fā)斑馬魚炎癥模型成功。80 µM 吲哚美辛組斑馬魚炎癥部位中性粒細胞數(shù) 11個,與模型對照組比較 P<0.001,其炎癥消退作用為 39%,說明吲哚美辛對炎癥斑馬魚有明顯抗炎作用。
中華跌打丸濃度為 222 µg/mL、667 µg/mL 和 2000 µg/mL時,斑馬魚炎癥部位中性粒細胞數(shù)分別為 10 個、6 個和 3 個,與模型對照組(18 個)比較 P 均<0.001,其炎癥消退作用分別為 44%、67%和 83%,說明中華跌打丸在本實驗濃度條件下對炎癥斑馬魚有明顯抗炎作用。
鬼畫符95%乙醇提取物濃度為28 µg/mL、83 µg/mL和250 µg/mL 時,斑馬魚炎癥部位中性粒細胞數(shù)分別為 10 個、6 個 和 5 個,與模型對照組(18 個)比較 P 均<0.001,其炎癥消退作用分別為 44%、67%和 72%,說明鬼畫符 95 乙醇提取物在本實驗濃度條件下對炎癥斑馬魚有明顯抗炎作用。
鬼畫符 50%乙醇提取物的濃度為 3.47 µg/mL、10.42 µg/mL和 31.25 µg/mL 時,斑馬魚炎癥部位中性粒細胞數(shù)分別為15 個、11 個和 8 個,與模型對照組(18 個)比較 P<0.05 &P<0.001&P<0.001,其炎癥消退作用分別為 17%、39%和56%,說明鬼畫符 50%乙醇提取物在本實驗濃度條件下對炎癥斑馬魚有明顯抗炎作用。
鬼畫符水提取物濃度為14 µg/mL、42 µg/mL和125 µg/mL時,斑馬魚炎癥部位中性粒細胞數(shù)分別為 9 個、9 個和 5 個,與模型對照組(18 個)比較 P 均<0.001,其炎癥消退作用分別為 50%、50%和 72%,說明鬼畫符水提取物在本實驗濃度條件下對炎癥斑馬魚有明顯抗炎作用。
鬼畫符水、50%乙醇、95%乙醇混合物濃度為 28 µg/mL、83 µg/mL 和 250 µg/mL 時,斑馬魚炎癥部位中性粒細胞數(shù)分別為 12 個、7 個和 6 個,與模型對照組(18 個)比較 P 均<0.001,其炎癥消退作用分別為 33%、61%和 67%,說明鬼畫符水、50 乙醇、95 乙醇混合物在本實驗濃度條件下對炎癥斑馬魚有明顯抗炎作用。詳見圖 1、圖 2 和表 2。



三、實驗結(jié)論
本實驗組已對中華跌打丸及鬼畫符各提取物炎癥斑馬魚測定濃度(MTC)進行測定,根據(jù)各實驗組的斑馬魚死亡數(shù)量與毒性情況得到中華跌打丸、鬼畫符 95%乙醇提取物、鬼畫符 50%乙醇提取物、鬼畫符水提取物和鬼畫符水、50%乙醇、95%乙醇混合提取物的 MTC 分別為 2000 µg/mL、250 µg/mL、31.25 µg/mL、125 µg/mL、250 µg/mL,分別選取各實驗組 1/9、1/3 和 1/1 的 MTC 濃度作為中和跌打丸及鬼畫符提取物對硫酸銅誘導(dǎo)炎癥模型斑馬魚抗炎作用評價的實驗濃度。
實驗結(jié)果表明,中華跌打丸和鬼畫符各提取物對硫酸銅誘導(dǎo)的炎癥斑馬魚均表現(xiàn)出顯著的抗炎作用,且均呈劑量依賴性。與吲哚美辛陽性對照組相較,除鬼畫符 50%乙醇提取物 3.47 µg/mL 濃度組外,其余各組對炎癥斑馬魚的抗炎作用更佳,推測鬼畫符藥材可能是中華跌打丸抗炎作用的主要成分之一。
由于中華跌打丸組方藥味數(shù)眾多,后續(xù)還需進一步開展其他藥材的抗炎作用評價研究,以明確中華跌打丸抗炎作用的藥效物質(zhì)基礎(chǔ),為臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。
免責(zé)聲明