摘要：目的探討人參中人參皂苷Rg1、Re和Rb1的HPLC定量分析方法的測量不確定度的評定方法。方法：通過分析測量過程，確定并簡化不確定度來源；利用HPLC法測定人參中人參皂苷Rg1、Re和Rb1的方法驗證數(shù)據(jù)及經(jīng)驗數(shù)據(jù)，通過統(tǒng)計學方法，量化不確定度分量；計算合成不確定度和擴展不確定度。結果用HPLC法測定人參中人參皂苷Rg1、Re和Rb1的擴展不確定度分別為0.12e，0.14e和0.13e。結論測量不確定度可用于人參中人參皂苷的標準*的制定；測量不確定度的評定方法的確立對于中藥質量標準的研究具有重要意義。
    關鍵詞：測量不確定度；人參皂苷；液相色譜法；人參
    測量不確定度（measurement uncertainty）是“與測量結果相關聯(lián)的參數(shù)，表征合理地賦予被測量量值的分散性”，它是被測量客觀值在某一量值范圍內(nèi)的一個評定，其大小決定了測量結果的實用價值。不確定度越小，測量結果的質量越高，使用價值越大。測量不確定度與誤差是兩個不同的概念，誤差在實際應用中難以確切求得，因此測量不確定度的提出引發(fā)了經(jīng)典誤差理論及測量結果評定與表示的重大變革，是現(xiàn)代誤差理論形成的基礎。1993年出版的《測量不確定度表示指南》（GUM）中明確規(guī)定了測量不確定度的定義、評定方法及表達方式，從而使不同學科、不同地域在表示測量結果及不確定度時具有一致的含義。
    《測量不確定度表示指南》頒布以來，已被許多性、區(qū)域性組織和國家采用。在分析化學領域，1995年由歐洲化學委員會（EURACHEM）起草了《分析測量中不確定度的評定》 ，指引如何將《測量不確定度表示指南》中的定義應用于分析測定。目前，測量不確定度的概念在國家計量基準、標準物質的研究和對比中應用廣泛，同時逐漸向其他領域滲透。因此，正確表達和評定測量方法的測量不確定度將逐步成為通行的要求。
    本文將測量不確定度的概念引入中藥質量評價及標準制定中，以人參藥材中人參皂苷Rg1，Re和Rb1的HPLC定量方法的測量不確定度的評定為例，探討以方法學驗證數(shù)據(jù)評定測量不確定度的過程，評定結果可用于人參的質量標準的制定。
    材料與方法
    儀器與試劑 美國Agilent HP1100型液相色譜儀，二極管陣列檢測器。人參皂苷Rg1，Re和Rb1均購自中國藥品與生物制品檢定所，含量不低于98％。HPLC級乙腈為美國Merck公司產(chǎn)品，甲醇為分析純（LAB SCAN，愛爾蘭），水為Milli Q超純水。人參藥材由香港政府衛(wèi)生署提供。
    分析條件Beckman Ultrasphere ODS柱（250mm×4.6 mm ID，5μm）；流速1.6mL/min；柱溫25℃；檢測波長203 nm。流動相由乙腈和水組成，梯度洗脫程序為：0—20 min，乙腈的體積百分比為20％；20—60 min，乙腈的體積百分比由20％增至42％
    結果與討論
    1 精密度研究
    分析10批人參藥材，每批藥材測定兩次，人參皂苷Rg1，Re和Rb1的測量結果及相對標準不確定度。
    2 誤差研究
    在用HPLC法測定人參中人參皂苷Rg1，Re和Rb1的方法學驗證中測定了5次加樣回收率，測量結果及不確定度分析。
    3 對照品純度
    對照品人參皂苷Rg1，Re和Rb1的標示含量不低于98％
    4 樣品均勻性
    人參皂苷在人參藥材的各部位均有分布，不揮發(fā)，且化學性質較穩(wěn)定，根據(jù)文獻，樣品均勻性引起的相對標準不確定度取估計值0.05。
    5 合成標準不確定度和擴展標準不確定度
    6 影響人參中人參皂苷Rgl，Re和Rbl的含量測量方法的測量不確定度的因素分析
    各不確定度分量對合成相對標準不確定度的貢獻?？梢?，樣品的不均勻性對人參藥材中人參皂苷Rgl，Re和Rbl的HPLC定量方法的測量不確定度影響zui大，而對照品純度的影響zui小。因此樣品不均勻性這一參數(shù)在分析測定時應加以嚴格控制，例如采用合理的取樣方式、增加取樣量、控制粉碎粒度等。
    7 測量不確定度的應用
    目前測量不確定度的重要性已經(jīng)得到廣泛的認識，一個完整的定量分析結果應該包含不確定度信息，它是定量分析結果的重要組成部分，可用于評估定量方法的可靠性和測量結果的可信程度。此外，測量方法的不確定度在方法學研究等方面也能提供有益的指導，如提供分析過程的主要誤差來源信息以及解決方案等。
    測量不確定度的另一個用途是用于標準的制定。HPLC法測定人參中人參皂苷Rgl，Re和Rbl的含量是香港中藥標準中人參藥材下的檢測項，該標準的檢測*是根據(jù)l0批代表性藥材中人參皂苷的測量平均值及相對標準偏差，以及測量方法的不確定度計算得到。標準制定時考慮測量結果的不確定度，制定的標準*將更加合理。因此，進行測量不確定度的評定方法研究對于中藥標準的制定具有重要意義。
References：
l 1 f International Bureau of Weights and Measures．IS0． Guide to the Expression of Uncertainty in Measurement，International Organization for the Standardization[Z]．Geneve：ISO，1995．2—3．