該細(xì)胞由原代人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞使用慢病毒導(dǎo)入SV40 大T抗原及人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶 (hTERT) 基因,經(jīng)抗性篩選后的穩(wěn)轉(zhuǎn)株。該細(xì)胞攜帶G418 和潮霉素抗性。
種屬/性別/年齡:人/新生兒
組織來源:臍帶;靜脈
生長特性:貼壁
形態(tài)特征:梭形或鵝卵石樣
推薦傳代比例:1:3-1:4
培養(yǎng)基:內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基(科瑞賽#CMP-1001)
氣相及溫度:95%空氣,5%二氧化碳;37℃

復(fù)蘇:
1: 提前將培養(yǎng)基從冰箱取出恢復(fù)至室溫,并將水浴鍋調(diào)至37℃;
2: 準(zhǔn)備一個T25培養(yǎng)瓶和一支15mL 尖底離心管,并分別加入5mL、4mL 配好的培養(yǎng)基;
3: 將凍存管管身浸入水浴鍋37℃水中(管蓋部分露出)并快速搖晃至內(nèi)容物全部融化(務(wù)必在1-2min 內(nèi)完成);
4: 立即取出凍存管,75%乙醇消毒凍存管后移至生物安全柜,吸出懸液加入備好的15mL 離心管,200xg 室溫離心5min;
5: 棄去上清后,用食指指肚輕撥離心管底部以分散細(xì)胞沉淀,加入新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25 培養(yǎng)瓶,將培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面平放在臺面輕輕前后左右晃動培養(yǎng)瓶若干次以使細(xì)胞分布均勻 ;
6: 如使用的是透氣培養(yǎng)瓶可直接放入培養(yǎng)箱培養(yǎng),非透氣培養(yǎng)瓶請擰松瓶蓋后再放入培養(yǎng)箱。
















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