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封板膜和預(yù)包被抗體微孔板吸收
封板膜與預(yù)包被抗體微孔板的吸附特性分析
一、封板膜的功能特性
物理屏障作用?
防止液體蒸發(fā)和交叉污染,維持37℃孵育時(shí)的濕度平衡?
材質(zhì)需具備耐高溫性(可耐受≥80℃)和化學(xué)穩(wěn)定性(抗有機(jī)溶劑腐蝕)?
吸附控制要求?
低蛋白吸附表面設(shè)計(jì)(如聚丙烯材質(zhì))可減少非特異性結(jié)合?
封板膜與微孔板邊緣需緊密貼合,避免氣泡殘留影響溫育均勻性
二、預(yù)包被抗體微孔板的吸附機(jī)制
固相基質(zhì)選擇?
高結(jié)合力聚苯乙烯微孔板(如MaxiSorp)通過(guò)疏水作用被動(dòng)吸附抗體?
蛋白A/G/L包被板通過(guò)Fc區(qū)或輕鏈特異性結(jié)合抗體,實(shí)現(xiàn)定向固定?
包被工藝關(guān)鍵參數(shù)?
抗體濃度通常為1-10 μg/mL,包被緩沖液pH 9.6(碳酸鹽緩沖液)優(yōu)化吸附效率?
4℃過(guò)夜孵育可形成單層抗體覆蓋,避免空間位阻影響抗原結(jié)合?
三、質(zhì)量控制要點(diǎn)
批間一致性驗(yàn)證?:通過(guò)人IgG標(biāo)準(zhǔn)品(10 ng/mL)檢測(cè)板間CV值應(yīng)<10%?
非特異性控制?:封閉液推薦3% BSA/PBS,封閉時(shí)間≥1小時(shí)?
注:以上僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒
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