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【試劑描述】
Atto 425作為一種藍(lán)光激發(fā)的熒光染料,配備有NHS(N-羥基琥珀酰亞胺)活性酯基團(tuán),能夠與胺基(像蛋白質(zhì)、抗體以及肽鏈里的賴氨酸殘基所含的胺基)產(chǎn)生共價(jià)結(jié)合反應(yīng)。Atto 425 NHS Ester的分子結(jié)構(gòu)里包含NHS活性酯基團(tuán),該基團(tuán)可在溫和條件下與初級(jí)胺特異性反應(yīng),進(jìn)而生成穩(wěn)定的酰胺鍵。這種借助化學(xué)手段進(jìn)行修飾的方法,在標(biāo)記蛋白質(zhì)、多肽以及其他含氨基的生物分子方面應(yīng)用廣泛。
【試劑信息】
中文名稱:ATTO 425琥珀酰亞胺酯、ATTO 425-N-羥基琥珀酰亞胺酯
英文名稱:ATTO 425 NHS ester;ATTO 425 SE;ATTO 425-NHS;
CAS號(hào):892156-28-4
分子式:C??H??N?O?
分子量:498.52
純度:≥95%
外觀:藍(lán)色固體/粉末
溶解性:可溶于DMSO、DMF、乙醇及水溶液(需避光)
結(jié)構(gòu)式:
安全性:

操作時(shí)需佩戴防護(hù)裝備,避免接觸皮膚和眼睛。
如不慎接觸,請(qǐng)立即用大量清水沖洗,并尋求醫(yī)療幫助。
【應(yīng)用范圍】
蛋白質(zhì)與抗體標(biāo)記:借助NHS酯和蛋白質(zhì)賴氨酸殘基上的胺基發(fā)生共價(jià)結(jié)合反應(yīng),實(shí)現(xiàn)熒光標(biāo)記抗體的制備。
細(xì)胞成像:對(duì)細(xì)胞表面蛋白或細(xì)胞內(nèi)蛋白進(jìn)行標(biāo)記,以便利用熒光顯微鏡開(kāi)展觀察工作。
流式細(xì)胞術(shù):充當(dāng)熒光探針,用于分析細(xì)胞群體特征。
免疫熒光分析:提升檢測(cè)的靈敏度以及信號(hào)的特異性。
分子相互作用研究:作為示蹤劑,用于開(kāi)展結(jié)合動(dòng)力學(xué)和空間分布方面的研究。
【使用注意事項(xiàng)】
此試劑對(duì)水分較為敏感,保存時(shí)需避光、保持干燥,并置于低溫環(huán)境中冷藏。標(biāo)記反應(yīng)要在堿性緩沖液(pH約7.5 - 8.5)里進(jìn)行,以此確保胺基的活性。標(biāo)記結(jié)束后,要及時(shí)去除未參與反應(yīng)的游離染料,降低背景信號(hào)干擾。進(jìn)行活細(xì)胞標(biāo)記時(shí),要留意細(xì)胞毒性問(wèn)題,并優(yōu)化染料濃度。
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